ВВЕДЕНИЕ 3
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 4
1.1 Заболевания яблони 4
1.2 Общая характеристика вирусов яблони 5
1.2.1 Вирус хлоротической пятнистости листьев яблони 6
1.2.2 Вирус бороздчатости ствола яблони 7
1.2.3 Вирус растрескивания ствола яблони 8
1.3 Методы детекции вирусов 9
1.3.1 ОТ-ПЦР в диагностике вирусных болезней 11
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 13
2.1 Материалы исследований 13
2.2 Методы исследований
2.2.1 Детекция вирусов яблони ACLSV, ASGV, ASPV иммуноферментным методом (DAS-ELISA) 13
13
2.2.2 Выделение тотальной РНК из листьев яблони 13
2.2.3 Конструирование праймеров для ОТ и мультиплекс ПЦР 14
2.2.4 Получение кДНК вирусов путем обратной транскрипции и мультиплекс ПЦР на основе полученных кДНК
16
2.2.5 Электрофорез в агарозном геле 17
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 19
3.1 Детекция вирусов методом ИФА 19
3.2 Выделение тотальной РНК из образцов листьев яблони 21
3.3 Конструирование праймеров для ОТ и мультиплекс ПЦР 22
3.4 Детекция вирусов с помощью мультиплекс ПЦР 22
3.5 Сравнительный анализ результатов ИФА и мультиплекс ОТ-ПЦР
24
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 27
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 28